蝙蝠是唯一會飛行的哺乳動物,約占哺乳動物種類的20%(僅次于嚙齒目),,含20科,,1200多種。蝙蝠因攜帶多種人畜共患病毒而無明顯疾病表現(xiàn),、長壽命、腫瘤發(fā)生率低和代謝高的典型生物學(xué)特征,,在醫(yī)學(xué)以及生命科學(xué)領(lǐng)域受到越來越多的重視,。
我校姚新生團(tuán)隊(duì)基于馬鐵菊頭蝠、蒼白矛吻蝠,、伏翼的TRB-VDJC胚系基因注釋,,生成了蝙蝠TRB胚系基因參考數(shù)據(jù)庫,初步構(gòu)建出用于分析不同種類蝙蝠TCR CDR3組庫,,建立了初步試用于蝙蝠TRB-VDJC分析的MiXCR分析工具平臺,。通過杭州艾沐蒽公司完成的中菊頭蝠樣本制備、5’RACE法進(jìn)行TCR beta chain CDR3組庫的建庫,、ImmuHub?技術(shù)平臺二代測序,,獲取原始的下機(jī)數(shù)據(jù)(數(shù)據(jù)已在公共平臺共享),從VDJ的取用、CDR3區(qū)的長度和AA組成,、CDR3 motif,、CDR3的多樣性和克隆性、CDR3區(qū)核苷酸的插入和缺失等特征,,根據(jù)團(tuán)隊(duì)多年在人和小鼠TCR CDR3組庫研究中的積累,,首次對比闡述了蝙蝠TRB CDR3組庫的基本特征,為開展蝙蝠T細(xì)胞抗病毒,、抗腫瘤的特異應(yīng)答或耐受機(jī)制,,提供了全新的解決方案。
該研究采用IMGT-LIGMotif和12/23 RSS motif screen等工具和方法,,首次從胚系基因水平注釋出馬鐵菊頭蝠,、蒼白矛吻蝠、伏翼的TRB的VDJC基因和RSS序列:Rhinolophus ferrumequinum:29 TRBV,;15 TRBJ,;2 TRBD;2 TRBC,;Phyllostomus discolor:100 TRBV,;13 TRBJ;2 TRBD,;2 TRBC,;Pipistrellus pipistrellus:15TRBV;13 TRBJ,;2 TRBD,;2 TRBC。將3種蝙蝠TRB-VDJC基因,,同目前已注釋的哺乳動物TRB基因座基因進(jìn)行了同源性和差異比較(IMGT中完整TRB基因座注釋的哺乳動物: 牛,,駱駝,狗,,貓,,猩猩,鼠,,人,,猴,雪貂,,兔,,羊,豬),。新增加的蝙蝠TRB VDJC胚系基因注釋,,使具有完整的哺乳動物TRB基因座物種數(shù)目由12種增加到13種,,為探討蝙蝠T細(xì)胞應(yīng)答的特征以及從進(jìn)化角度對比分析不同哺乳動物之間適應(yīng)性免疫的進(jìn)化提供了具體的對比的基因序列(VDJC和RSS 序列已全部公開共享)。
本項(xiàng)目獲得國家自然科學(xué)基金(31860257) 和貴州省高層次人才項(xiàng)目(No. [2018] 5637)的支持,,目前課題組開展的創(chuàng)新性工作,,為進(jìn)一步開展蝙蝠的T細(xì)胞適應(yīng)性免疫應(yīng)答、蝙蝠和病毒的協(xié)同進(jìn)化等研究提供了基礎(chǔ)和全新的方向,。(審核:一審李曉,、二審楊清玉、三審李均,,圖文:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院)